ПЦР-диагностика, полимеразная цепная реакция 

(информация для специалистов)

ПЦР-диагностика представляет собой генетическое исследование биоматериала, с помощь которого возможно определить как наследственные, так и инфекционные заболевания.

В основе метода лежит идентификация генетического материала (ДНК и РНК) возбудителя в пробах, полученных от обследуемого пациента.

В специальный реактор помещают биопробу и добавляют  ферменты ДНК-полимеразы. Они соединяются с ДНК микроба и воспроизводят (амплифицируют) ее копию. Этот цикл повторяется множество раз, в результате чего образуются сотни-тысячи копий. Это дает возможность проанализировать и сравнить с базой данных, содержащей информацию о строении ДНК различных микроорганизмов.

Помимо качественного ответа о наличии или отсутствии микроба в организме, ПЦР-диагностика позволяет количественно оценить микроорганизмы в различных пробах. Это очень важно в диагностике и оценке эффективности лечения многих хронических заболеваний.

Метод полимеразной цепной реакции обладает высокой степенью специфичности и позволяет диагностировать большое разнообразие болезней, в том числе и «скрытых» инфекций.

Материал для сдачи ПЦР-анализа:

Для проведения исследования используются различные биоматериалы:

- соскоб эпителиальных клеток (соскоб из уретры у мужчин и у женщин, соскоб из цервикального канала) - при подозрении на заболевания, передающиеся половым путем,

- кровь, плазма, сыворотка крови – при диагностике ВИЧ-инфекции и вирусного гепатита С,

- биологические жидкости (сок простаты, плевральная, спинномозговая, околоплодная, суставная жидкости, слюна),

- моча (первая порция утренней мочи),

- мокрота,

- мазок из зева – при инфекционном мононуклеозе,

- слизь и другие биологические выделения.

Подготовка к проведению исследования:

- ПЦР-диагностика крови осуществляется натощак.

- для ПЦР-диагностики мочи используется первая утренняя порция, собранная в чистый, стерильный контейнер.

- При проведении ПЦР-диагностики в случае подозрения на инфекции, передающиеся половым путем, необходимо исключить половые контакты за сутки до исследования.

Интерпретация результатов:

При качественном определении ДНК возможно два варианта ответов: отрицательный и положительный.

Отрицательный результат говорит об отсутствии следов инфекции в исследуемом материале. Чаще всего это случается при отсутствии инфекции в организме. Однако, возможно получение ложноотрицательного результата. Например, при проведении антибиотикотерапии или при малом количестве биоматериала, не позволяющем обнаружить ДНК возбудителя.

Положительный результат означает, что в пробе материала были обнаружены следы инфекции, что с большой степенью вероятности говорит о заражении обследуемого организма. Однако, так же возможны ложноположительные результаты, связанные с нарушением правил проведения исследования в лаборатории и попаданием в пробу чужеродных фрагментов ДНК.

Особенности ПЦР-диагностики:

- точное определение наличия или отсутствия инфекции,

- специфичность, то есть определение конкретного возбудителя,

- чувствительность, то есть обнаружение даже мельчайших фрагментов ДНК микробов в биологическом материале,

- возможность диагностики инфекционных заболеваний на самых ранних стадиях болезни,

- возможность количественной оценки ДНК возбудителя,

- низкая вероятность по сравнению с другими методами исследования ложноположительных и ложноотрицательных результатов,

- быстрое получение результатов (чаще всего требуется от нескольких часов до 1 дня),

- меньшая по сравнению с другими методами исследования трудоемкость.